リアルタイムPCR

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qPCR
今回は、リアルタイムPCR実験で陥りがちな落とし穴Top10を紹介します。 ▼こんな方におすすめ リアルタイムPCR初心者 リアルタイムPCR実験で困っている方 1. プライマーおよびプローブ設計が適切ではない リアルタイムPCR用のPCRプライマーおよびプローブを最も効率的に設計するためには、プライマー設計ソフトウェ...
TaqManアッセイに関する5つのヒミツとは?
その1. ~TaqManアッセイの由来~ Applied Biosystems™ TaqMan™アッセイはもともと1980年代のビデオゲーム、Pac-Manにちなんで名付けられました。Pac-Manは、日本のビデオゲームデザイナーである岩谷徹氏によって開発されたゲームで、米国発売後に絶大な人...
Ask TaqMan – リアルタイムPCRについての質問はありますか?
リアルタイムPCRを使い始めの方も、長年使っている方も、リアルタイムPCRやデジタルPCRについて質問があるでしょう。 そんなあなたの質問をAsk TaqManビデオで我々スタッフが答えます。皆様も疑問に思うことがあれば、Asq Taqmanで質問を投稿してみてはいかがでしょうか? 本日は、当ビデオシリーズから人気の高...
【リアルタイムPCRユーザー必見】プライマーダイマーを減らす新しいSYBR Greenマスターミックスとは?
リアルタイムPCRの解離曲線でみられる問題点 みなさんは、リアルタイムPCR (qPCR )の解離曲線(融解曲線)において、複数のピークを目にしたことがあるでしょうか? 下図は、一般的なSYBR Greenマスターミックスによって得られた解離曲線データです。 ご覧のとおり、ターゲットの86.7℃のメインピークのほかに複...
これでもう失敗しない!リアルタイムPCRに失敗する4つの問題点と解決策をご紹介
理想的なリアルタイムPCR解析を実行するには、最適化によって反応のすべてのパラメータをきめ細かく調整し、正確な結果が確実に得られるようにすることが必要です。新しい遺伝子の研究を始める場合、または解析のパラメータを変更する場合には常に、必要なすべての反応調整を含む解析の検証を行う必要があります。今回は、リアルタイムPCR...
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リアルタイムPCRにおける適正な定量法は実験の目的によって異なります。絶対定量法によって、ターゲットの実際のコピー数が決定されますが、絶対定量法は最も煩雑で困難な定量方法です。比較定量法においても綿密な実験計画が必要ですが、得られるデータは正確なコピー数ではなくサンプル間の相対値になります。比較定量法には、ΔΔCt法と...
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試料の量の標準化、RNAまたはDNAの量の標準化、コントロール遺伝子での標準化など、リアルタイムPCRの各段階において、それぞれ個別の標準化法が存在しますが、効果はそれぞれ異なります。今回は、リアルタイムPCRにおけるさまざまな標準化法についてご紹介します。